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- Title
Desarrollo y validación de un método analítico para la cuantificación de tizoxanida en plasma.
- Authors
Ruíz, María Isabel; Castro, Nelly; Castillo, Rafael; Helgi Jung Cook
- Abstract
Introducción: la nitazoxanida es un fármaco tipo nitroinmidazólico con amplia actividad cestocida. Se metaboliza completamente a tizoxanida (TZO) que es un metabolito activo y al combinarse con albendazol se incrementa su actividad antiparasitaria. Este fármaco ha demostrado alta efectividad contra protozoarios (cryptosporidium parvum, Isospora belli, cyclospora cayaetanensis, giardia lambia y entemoaba histolitica entre otros) y bacterias Gram positivas y negativas. Estudios previos realizados en el laboratorio empleando modelos in vitro, han demostrado que posee actividad contra taenia solium y t. crassiceps por lo que se considera de interés el continuar con la investigación farmacocinética de este fármaco, para lo cual, es necesario desarrollar un método analítico para su cuantificación en fluidos biológicos. Objetivo: desarrollar y validar un método analítico por cromatografía de líquidos de alta resolución fase reversa para la cuantificación de tizoxanida en plasma. Metodología: la cuantificación de TZO se realizó utilizando cromatografía de líquidos de alta resolución en fase reversa con detección UV. El método fue el siguiente: 1 ml de plasma se acidificó con 2 ml de disolución amortiguadora de fosfato monobásico de potasio a una concentración de 0.01 m. Se extrajo con 7 ml de acetato de etilo. Las muestras se agitaron de manera horizontal y se centrifugaron, la fase orgánica se separó y se evaporó a sequedad con N2. La muestra se reconstituyó en 120 ml de metanol y se inyectaron 80 µl al cromatógrafo. Como estándar interno se utilizó el compuesto 4-(2,3-Diclorofenoxi)-1,2-nitroanilina, el cual posee propiedades fisicoquímicas semejantes. La separación cromatográfica se realizó en una columna C18 de sílica (250 x 4.6 mm), con un gradiente de elución que presentaba como fase móvil una disolución amortiguadora de fosfatos 0.01 M (pH=2.5):acetonitrí!o (50:50 a 10:90 v/v), con una velocidad de flujo de 1.5 ml/min y detección UV a 350 nm. Resultados: la curva de calibración para TZO fue lineal en un rango de concentración de 0.078-10 mg/ml. El promedio de recobro es de 90%. El método desarrollado es específico y sensitivo, el límite de cuantificación es de 0.078 mg/ml y el límite de detección de 0.039 mg/mL para TZO. Conclusiones: el método desarrollado es confiable y puede ser utilizado para cuantificar tizoxanida en plasma en estudios farmacocinéticos y de monitoreo terapéutico.
- Publication
Archivos de Neurociencias, 2005, Vol 10, p33
- ISSN
1028-5938
- Publication type
Article