We found a match
Your institution may have access to this item. Find your institution then sign in to continue.
- Title
RNA interference targeting glycoprotein D inhibits infectious bovine rhinotracheitis virus replication in MDBK cells.
- Authors
Lingling Song; Hui Zhang; Hongmei Wang; Peili Hou; Xianzhu Xia; Hongbin He
- Abstract
Infectious bovine rhinotracheitis (IBR) is an acute, febrile, contagious disease caused by infectious bovine rhinotracheitis virus (IBRV). IBRV vaccine is considered to be partially effective but not yet completely successful. Therefore, establishing a new antiviral approach is critical. RNA interference (RNAi) has been rapidly developed in recent years as an antiviral therapy for several viruses. This study showed that RNAi could suppress IBRV replication via knockdown of a virion glycoprotein. Two recombinant lentiviral vectors containing short hairpin RNAs (shRNAs) (H1-RNA-121, H1-RNA-304) against the glycoprotein gD of IBRV and a pcDNA3-gD vector containing a FLAG tag were constructed. pcDNA3-gD and the individual shRNA recombinant lentiviral vectors were co-transfected into 293T cells, and the efficiency of RNAi was verified using Western blotting. H1-RNA-304 strongly suppressed the transient expression of the FLAG-tagged gD fusion protein. The recombinant H1-RNA lentivirus was packaged by transfecting the 293T cells with the recombinant H1-RNA vector and two helper plasmids using Lipofectamine, and the lentivirus was then used to infect MDBK cells. When the MDBK cells were infected with IBRV after infection with the H1-shRNAs, H1-shRNA-304 was more effective at markedly silencing viral gD gene expression and it inhibited IBRV replication. These results indicate that shRNAs targeting the gD gene have substantial antiviral properties and inhibit IBRV replication in a sequence-specific manner, demonstrating their potential for clinical application. โรค Infectious bovine rhinotracheitis (IBR) เป็นโรคติดเชื้อไวรัสเฉียบพลัน เกิดจาก เชื้อไวรัส infectious bovine rhinotracheitis virus (IBRV) เนื่องจากการใช้วัคซีนป้องกันโรค IBRV ให้ผลในการป้องกันโรคไม่เต็มประสิทธิภาพ ดังนั้นการรักษาโดยใช้การ ต้านไวรัส เช่น RNA interference (RNAi) จึงมีการพัฒนาและนาไปใช้ในเชื้อไวรัสหลายชนิด การศึกษาครั้งนี้พบว่า RNAi สามารถยับยั้งการ เพิ่มจานวนของเชื้อ IBRV โดยหยุดการสร้าง glycoprotein ของเชื้อไวรัส การศึกษาครั้งนี้ได้สร้าง recombinant lentiviral vector จานวน 2 ชนิด ได้แก่ vector ที่ประกอบด้วย short hairpin RNAs (shRNAs) (H1-RNA-121, H1-RNA-304) สาหรับยับยั้ง glycoprotein gD ของ เชื้อไวรัส IBRV และ pcDNA3-gD ที่ประกอบด้วย FLAG tag จากนั้นนา vector ทั้ง 2 ชนิดมานาเข้าในเซลล์ชนิด 293T และได้ตรวจสอบ ประสิทธิภาพของ RNAi ด้วยวิธี Western blotting ผลการศึกษาพบว่า H1-RNA-304 สามารถยับยั้งการสร้างโปรตีน FLAG-tagged gD และเมื่อนา recombinant lentiviral vector มาเข้าในเซลล์ชนิด MDBK และทดสอบกับเชื้อไวรัส IBRV พบว่า H1-shRNA-304 สามารถ ยับยั้งการแสดงออกของยีน gD และยับยั้งการเพิ่มจานวนของเชื้อไวรัส IBRV ผลการศึกาาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่า shRNAs สาหรับยีน gD มี คุณสมบัติในการต้านไวรัส โดยยับยั้งการเพิ่มจานวนของเชื้อไวรัส IBRV ดังนั้นจึงมีความเป็นไปได้ในการนา RNAi มาใช้ทางคลินิกในอนาคต
- Subjects
GLYCOPROTEINS; RNA interference; INFECTIOUS bovine rhinotracheitis; VIRAL replication; MAMMAL cytology; THERAPEUTICS
- Publication
Thai Journal of Veterinary Medicine, 2016, Vol 46, Issue 3, p373
- ISSN
0125-6491
- Publication type
Article