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- Title
Analysis of the genetic region encoding a novel rhizobiocin from Rhizobium leguminosarum bv. viciae strain 306.
- Authors
Venter, Alexandra P; Twelker, Sunny; Oresnik, Ivan J; Hynes, Michael F
- Abstract
Cross-testing of a number of strains of Rhizobium leguminosarum for bacteriocin production revealed that strain 306 produced at least two distinct bacteriocins. Further analysis involving plasmid transfer to Agrobacterium and other hosts demonstrated that there were bacteriocin determinants on plasmids pRle306b and pRle306c, as well as a third bacteriocin. The bacteriocin encoded by pRle306b was indistinguishable from the bacteriocin encoded by strain 248, whereas the bacteriocin encoded by plasmid pRle306c had a distinctive spectrum of activity against susceptible strains, as well as different physical properties from other bacteriocins that we have studied in our lab. Two mutants altered in production of the pRle306c bacteriocin were generated by transposon Tn5 mutagenesis, and the DNA flanking the transposon inserts in these mutants was cloned and characterized. DNA sequence analysis suggested that the pRle306c bacteriocin was a large protein belonging to the RTX family, and that a type I secretion system involving an ABC type transporter was required for export of the bacteriocin. A mutant unable to produce this bacteriocin was unaltered in its competitive properties, both in broth and in nodulation assays, suggesting that the bacteriocin may not play a major role in determining the ecological success of this strain.Key words: Rhizobium, bacteriocins, RTX proteins, plasmids.Une analyse en croisé de la production de bactériocine d'un certain nombre de souches de Rhizobium leguminosarum a révélé que la souche 306 produit au moins deux bactériocines distinctes. Une analyse plus poussée mettant en jeu le transfert de plasmides à Agrobacterium et à d'autres hôtes a démontré que des déterminants de bactériocines se retrouvaient sur les plasmides pRle306b et pRle306c, de même qu'une troisième bactériocine. La bactériocine codée par pRle306b était identique en tout point à la bactériocine codée par la souche 248, alors que la bactériocine codée par le plasmide pRle306c avait un spectre d'activité distinctif contre les souches susceptibles, de même que des propriétés physiques différentes des autres bactériocines étudiées dans notre laboratoire. Deux mutants ayant une production modifiée de la bactériocine pRle306c ont été générés par mutagénèse du transposon Tn5, et l'ADN flanquant les inserts de transposons dans ces mutants fut cloné et caractérisé. L'analyse de la séquence d'ADN a indiqué que la bactériocine pRle306c était une grosse protéine appartenant à la famille RTX, et que le système de sécrétion de type I impliquant un transporteur de type ABC était nécessaire pour l'exportation de la bactériocine. Un mutant incapable de produire cette bactériocine avait des propriétés compétitives inchangées, à la fois dans un bouillon et dans des tests de nodulation, ce qui signifierait que la bactériocine ne jouerait pas une rôle majeur dans la détermination du succès écologique de cette souche.Mots clés : Rhizobium, bactériocines, RTX protéines, plasmides.[Traduit par la Rédaction]
- Subjects
RHIZOBIUM leguminosarum; BACTERIOCINS; PLASMIDS; PROTEINS; TRANSPOSONS
- Publication
Canadian Journal of Microbiology, 2001, Vol 47, Issue 6, p495
- ISSN
0008-4166
- Publication type
Article
- DOI
10.1139/w01-043